La citometría de flujo multicolor es una herramienta valiosa para el análisis de células en la investigación científica. Sin embargo, la compensación es una tarea crítica en el proceso de diseño y análisis de experimentos de citometría de flujo multicolor. Este concepto se refiere al ajuste de los canales de detección para corregir la superposición de los espectros de emisión de diferentes fluoróforos. Si no se realiza una compensación adecuada, los datos pueden estar sesgados y dar lugar a resultados poco confiables y a tomar decisiones incorrectas.
Para que esto no ocurra, te entregamos ocho consejos útiles para mejorar la compensación en experimentos de citometría de flujo multicolor.
- Utiliza controles apropiados: Es esencial que utilices controles adecuados para la compensación. Los controles deben incluir células únicas que expresen cada fluorocromo presente en la muestra.
- Ajusta el voltaje adecuado: El voltaje puede afectar la cantidad de luz que se detecta y, por lo tanto, afectar la compensación. Ajusta el voltaje de manera óptima para cada canal para garantizar una señal adecuada.
- Evita la sobrecompensación: La sobrecompensación puede conducir a la subestimación de la señal del fluorocromo compensado.
- Usa reactivos frescos: Los reactivos degradados pueden afectar la compensación. Usa reactivos frescos para garantizar una compensación precisa.
- Considera los spillovers cruzados: Los spillovers cruzados pueden ocurrir cuando la emisión de un fluorocromo se superpone con la detección de otro fluorocromo. Considera cuidadosamente los spillovers cruzados al realizar la compensación.
- Analiza los resultados: Analiza los resultados para asegurarte de que los valores de compensación son razonables y que la distribución de células es correcta.
- Considera los cambios de lotes de reactivos: Los cambios de lotes de reactivos pueden afectar la compensación. Realiza controles de compensación al cambiar lotes de reactivos.
- Verifica la compensación de manera regular: Esto te permitirá garantizar que se mantenga precisa y reducir el margen de error.
Siguiendo estos consejos, puedes mejorar la precisión de la compensación en experimentos de citometría de flujo multicolor. Al hacerlo, puedes obtener resultados más precisos y confiables para tu investigación científica. En Platech junto con Miltenyi Biotec, estamos comprometidos a brindar soluciones innovadoras en citometría de flujo multicolor para ayudarte a alcanzar tus objetivos de investigación.
